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陰道分泌物微生態評價臨床應用研究

發布日期:2021-08-04

陰道炎是十分常見且易反復感染的一種疾病,常見的陰道炎有細菌性陰道病(BV)、陰道假絲酵母菌炎(VVC)、滴蟲性陰道炎(TV)和老年性陰道炎。陰道分泌物檢查是評價女性泌尿生殖道健康水平的重要指標。以往陰道分泌物常規檢測內容是顯微鏡鏡檢法和Amsel法。顯微鏡鏡檢法在檢測真菌和滴蟲上較為準確可靠,但對細菌性陰道病的檢測指標準確度不高;Amsel法檢測存在對線索細胞的觀察靈敏度低和經驗要求高等不足。基于干化學酶法的陰道分泌物檢測技術是近年發展起來的陰道炎快速診斷方法。本文以顯微鏡鏡檢法為參考方法,對干化學酶法診斷陰道炎的應用進行評價和研究,分析陰道分泌物的微生態分布,為臨床陰道炎診斷提供科學依據。

 

1.資料與方法

1.1標本來源

陰道分泌物來自就診于福州市馬尾區婦幼醫院婦科門診,年齡17-66歲,平均33歲,均未采取灌注療法及使用陰道乳劑的患者。用無菌女性棉拭子盡可能多的收集患者陰道后穹窿處分泌物,避免在宮頸口處采集(pH值較陰道內高),每位患者同時采集2份標本,1份涂玻璃片,滴加生理鹽水,涂勻后顯微鏡鏡檢,觀察白帶中的白細胞、線索細胞、念珠菌和滴蟲等有形成分并判斷清潔度。另1份采用陰道炎干化學酶法九聯試劑盒檢測。從2020年8月到2020年12月,共456例。

 

1.2試劑和方法

第1份標本做顯微鏡鏡檢分析,第2份標本做干化學酶法九項指標分析,陰道炎干化學酶法九聯試劑盒購置迪瑞醫療科技股份有限公司,儀器采用迪瑞GMD-S600全自動婦科分泌物分析系統,檢測pH值、白細胞酯酶(LE)、過氧化氫(H2O2)、乳酸(LA)、唾液酸苷酶(SNa)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)、N-乙酰氨基己糖苷酶(NAG)、氧化酶(OX)、β-葡萄糖醛酸酶(GUS)9項指標。試驗操作嚴格按說明書進行。

 

1.3判定標準

1.3.1 顯微鏡鏡檢法判定陰道分泌物清潔度標準:

Ⅰ級:桿菌多,球菌未見,上皮細胞滿視野,白細胞0~5個/高倍視野(HP);

Ⅱ級:桿菌少量,球菌少量,上皮細胞占1/2視野,白細胞5~15個/HP;

Ⅲ級:桿菌少,球菌多,上皮細胞少量,白細胞15~30個/HP;

Ⅳ級:桿菌未見,球菌大量,上皮細胞未見,白細胞>30個/HP。

Ⅰ級和Ⅱ級為正常;Ⅲ級和Ⅳ級為異常,反映陰道局部炎癥。

1.3.2 顯微鏡鏡檢法診斷滴蟲性陰道炎或真菌性陰道炎標準:

檢測出滴蟲和真菌認為是滴蟲性陰道炎或真菌性陰道炎。

 

1.4統計學處理

使用SPSS20.0統計軟件,計數資料采用kappa檢驗、配對卡方檢驗、行-列表卡方和四個表卡方檢驗。當kappa≥0.75時表明兩種方法一致性較好;當0.75>kappa≥0.4時,表明一致性一般;當kappa<0.4時,表明一致性較差。

 

 

⒉結果

 

2.1干化學酶法與顯微鏡鏡檢法檢測清潔度的符合性比較

陰道分泌物采用濕片顯微鏡鏡檢法,清潔度分級記做Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級。Ⅰ和Ⅱ級判定為正常,記為-,Ⅲ和Ⅳ級判定為異常,記為+,表明存在陰道局部炎癥。干化學酶法中的白細胞酯酶的定性結果-或+。兩種清潔度判定結果見表1。

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干化學酶法中白細胞酯酶與白帶常規濕片顯微鏡鏡檢診斷清潔度結果總符合率為80.0%,經一致性檢驗分析,Kappa=0.564,0.4

 

2.2顯微鏡鏡檢法和干化學酶法對細菌性陰道病檢出效果評估

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備注:七聯指標包括pH、H2O2、SNa、PIP、GUS、OX、LE七個指標,其中任何一個指標陽性,即七聯指標為陽性。

陰道分泌物分別用顯微鏡鏡檢法和干化學酶法(七聯指標)判斷為BV,檢測結果見表2,兩者率的比較采用χ2檢驗,χ2=121,P=0.0000<0.05,差異有統計學意義。與傳統的顯微鏡鏡檢法相比較,干化學酶法(七聯指標)診斷BV的敏感性為95.6%,特異性為3.70%,陽性預測值為64.3%,陰性預測值31.6%,兩者符合率62.9%。

 

2.3顯微鏡鏡檢法和干化學酶法對真菌性陰道炎檢出效果評估

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備注:兩聯指標包括pH、NAG 2個指標,NAG陽性且pH≤4.6為陽性。

陰道分泌物分別用顯微鏡鏡檢法和干化學酶法(兩聯指標)判斷為真菌性陰道炎,檢測結果見表3,兩者率的比較采用χ2檢驗,χ2=241,P<0.05,差異有統計學意義。與傳統的顯微鏡鏡檢法相比較,干化學酶法(兩聯指標)診斷真菌性陰道炎的敏感性為83.8%,特異性為96.4%,陽性預測值為67.4%,陰性預測值98.5%,兩者符合率95.4%。

 

2.4 顯微鏡鏡檢法和干化學酶法對滴蟲性陰道炎檢出效果評估

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備注:兩聯指標包括pH、NAG 2個指標,NAG陽性且pH≥4.8為陽性。

陰道分泌物分別用顯微鏡鏡檢法和干化學酶法(兩聯指標)判斷為滴蟲性陰道炎,檢測結果見表4,兩者率的比較采用χ2檢驗,差異非常顯著(P=0.000,χ2 = 313)。與傳統的顯微鏡鏡檢法相比較,干化學酶法(兩聯指標)診斷滴蟲性陰道炎的敏感性為83.3%,特異性為99.5%,陽性預測值為83.3%,陰性預測值99.5%,兩者符合率95.4%。

 

3.討論

BV作為婦科常見的疾病,在細菌學上表現為生殖道產H2O2的乳酸桿菌正常菌群的數量減少,而另一組類桿菌屬族、陰道加德納菌、嗜血桿菌等厭氧菌群的數量增加的臨床癥候群。PIP是由陰道加德納菌和動彎桿菌產生,是BV相關病原體所分泌的特異性標志酶,故陰道分泌物中存在PIP活性即可診斷BV[1,2]。國內學者周曉等[3]報道陰道菌群中除BV致病菌外,其他細菌僅產生少量或不產生PIP,所以PIP具有較高的特異性和陽性預測值。

本實驗結果表明,陰道炎干化學酶法通過對PIP結合SNa的聯合檢測,將傳統的陰道分泌物常規形態學檢測提高到特異性生化標志物的檢測, 避免了傳統檢測方法的人為主觀因素、標本保存條件、環境溫度要求造成的檢出率低、誤檢、漏判問題, 提高了檢測率和準確性,是一種較好的陰道分泌物常規檢查法。

同時,對于滴蟲性陰道炎這種全球性、十分常見的公共衛生性傳播疾病,陰道炎干化學酶法通過對pH值和NAG活性的聯合測定可判斷真菌性或滴蟲性陰道炎, 不受白帶標本的溫度和離體時間的影響,可以彌補顯微鏡鏡檢法在溫度低和離體時間長時滴蟲檢出率下降的缺點。

綜上所述,使用迪瑞品牌九聯檢試劑盒對陰道分泌物進行檢測簡單易行,結果客觀。該試劑盒檢測項目全面,基本上包括傳統顯微鏡能夠檢測的項目,且各項結果差異性較小,在細菌性陰道炎的診斷上更具優勢,值得臨床推廣,但現階段仍需結合顯微鏡鏡檢對婦科疾病診斷將會更有意義。

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參考文獻

[1]陳永琴,王利英. BV三項在陰道分泌物檢測中的應用及臨床結果分析[J].中國微生態學雜志,2008,20( 1) : 84-85.

[2]Hillier SL. Diagonsis microbiology of bacterial vaginos-tic[J]. Am J Obstet Gynecol,1993,169:455-459

[3]周曉,廖渝.細菌性陰道病快速診斷試劑盒臨床應用探討[J].中國實用婦科與產科雜志,2001,17(2):542-544

 

 

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